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光度計(jì)采用了怎樣的工作原理及使用方法步驟

更新時(shí)間:2022-02-17    點(diǎn)擊次數(shù):1382
   光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
 
  光度計(jì)由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,根據(jù)這一特性,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析。由于物質(zhì)濃度的不同,吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度也不相同,從而通過(guò)對(duì)物質(zhì)吸光度或透過(guò)率的測(cè)量判定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
 

光度計(jì)

 

  光度計(jì)使用的方法與步驟:
  (1)預(yù)熱儀器:
  為使測(cè)定穩(wěn)定,將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi),使儀器預(yù)熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷。
 
 ?。?)選定波長(zhǎng):
  根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。
 
 ?。?)固定靈敏度檔:
  根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動(dòng)靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。
 
 ?。?)調(diào)節(jié)“0”點(diǎn):
  輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí),比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的,光路被切斷,光電管不受光照)。
 
 ?。?)調(diào)節(jié)T=100:
  將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi),有色溶液放在其它格內(nèi),把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器,使透光度T=100,即,表頭指針恰好指在T=100處。
 
 ?。?)測(cè)定:
  輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿,使有色溶液進(jìn)入光路,此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華,讀數(shù)后,打開(kāi)比色皿暗箱蓋。
 
 ?。?)關(guān)機(jī):
  實(shí)驗(yàn)完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

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